1．說明
本檢測(cè)采用酶聯(lián)免疫法定量檢測(cè)神經(jīng)性貝毒的存在。神經(jīng)性貝毒是一種毒素，與貝殼類動(dòng)物的神經(jīng)中毒有關(guān)。本檢測(cè)可用于水產(chǎn)樣本對(duì)貝類毒素的定性和定量檢測(cè)，例如甲殼類動(dòng)物的樣本。對(duì)于甲殼類動(dòng)物的需要提前制備樣本。如果條件允許，陽性樣本可以做HPLC，GC/MS或其他方法確認(rèn)。
2．安全性說明
標(biāo)準(zhǔn)品溶液含有少量的神經(jīng)性貝毒。底物溶液含有四甲基聯(lián)苯胺，終止液還有稀硫酸。避免皮膚與粘膜與終止液接觸。若終止液與皮膚接觸，可用水洗去。
3．貯藏與穩(wěn)定性
試劑盒貯存在4-8°C。使用前試劑盒中溶液要恢復(fù)到室溫20—25度。在保質(zhì)期內(nèi)試劑盒都可以正常使用。
4．檢測(cè)原理
本實(shí)驗(yàn)采用直接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法，用特異性抗體識(shí)別神經(jīng)性貝毒。樣本中的神經(jīng)性貝毒可與貝毒-酶-結(jié)合物競(jìng)爭(zhēng)，同包被在微孔板上的羊抗-神經(jīng)性貝毒抗體結(jié)合。洗板加入底物溶液，顯藍(lán)色。藍(lán)色的深度與神經(jīng)性貝毒在樣本中的濃度成反比。顏色反應(yīng)在規(guī)定時(shí)間內(nèi)終止，顏色用酶標(biāo)儀讀值。每孔的樣本濃度值可以通過標(biāo)準(zhǔn)曲線來讀取。
A試劑盒包括
7.終止液，2 X 6ml
8.海水前處理溶液25ml
C檢測(cè)步驟
D結(jié)果分析
結(jié)果分析可以利用商業(yè)ELISA分析軟件(4-parameters,Logit/Log)。手工計(jì)算可以先計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)的吸光度值的平均值，然后計(jì)算每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的%B/B0（用其它標(biāo)準(zhǔn)的吸光度值除以零標(biāo)準(zhǔn)的吸光度值乘以100%）。以每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的%B/B0做Y軸，以每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的神經(jīng)性貝毒的濃度做X軸構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線。通過利用標(biāo)準(zhǔn)曲線，把對(duì)照和樣品的%B/B0代入標(biāo)準(zhǔn)可以計(jì)算出樣品中神經(jīng)性貝毒的濃度。樣品中神經(jīng)性貝毒的含量小于0.01 ppb認(rèn)為陰性。當(dāng)樣品中神經(jīng)性貝毒的含量大于2.0 ppb要稀釋后再測(cè)定。 |
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