His-tag是蛋白質(zhì)重組技術(shù)中經(jīng)常用到的一種標(biāo)簽,其序列為6個(gè)組氨酸HHHHHH,其特點(diǎn)是分子量小,只有不到0.84 KD,基本不改變蛋白質(zhì)的生物結(jié)構(gòu),不改變蛋白質(zhì)的溶解性,更重要的是它使蛋白質(zhì)的純化變得極為方便。
根據(jù)組氨酸上的咪唑環(huán)可以與二價(jià)金屬離子結(jié)合的原理,His-Tag 可結(jié)合在目的蛋白的C末端或N末端,形成特殊的結(jié)構(gòu),以便于進(jìn)行下一步的純化及檢測(cè)。人們可以利用金屬離子親和層析技術(shù)純化帶有His標(biāo)簽的蛋白,即將含有目的蛋白的裂解液通過固定的二價(jià)金屬離子(通常是二價(jià)Ni離子)填料,帶有6*his-tag的蛋白質(zhì)即與填料結(jié)合,其它蛋白不與填料結(jié)合,*后再用高濃度的咪唑即可將目的蛋白洗脫下來。
南京銘研生物的His抗體可以用于Western Blot、免疫細(xì)胞化學(xué)、免疫熒光和免疫沉淀實(shí)驗(yàn)等多種不同應(yīng)用,滿足您的多種實(shí)驗(yàn)需求。 |
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