選擇固定液的時候一定要根據(jù)不同的臟器選擇更加適合的固定液,另外,固定液的容器、取材操作以及固定液的體積也是很重要的。
取材手法:要求取材器械鋒利,避免擠壓挫傷樣本
取材速度:盡量保證樣本離體5min內(nèi)放入合適的固定液中
組織塊大小:厚度不要超過1CM
固定液量:固定液體積為組織的10倍,且組織能在容器內(nèi)自由移動,并做好清晰標記。
固定溫度:常溫即可,無需冷藏,切勿冷凍結(jié)冰。
問題:組織取的過厚,靠近中間的組織固定不好。
可能導(dǎo)致的后果:染色不均勻,伊紅不著色或著色淺,組織易裂片掉片
解決方案:提前告知客戶風(fēng)險,如果客戶能承擔(dān)風(fēng)險需簽字后進行實驗。實驗室盡可能取靠近邊緣固定相對較好的組織進行實驗。
問題:固定液渾濁有大量絮狀物,可能固定液濃度太低或者液體根本不是固定液或者固定時間不夠就轉(zhuǎn)移至PBS,純水中等。組織固定不徹底或者完全沒有固定。
可能導(dǎo)致的后果:組織自溶細胞結(jié)構(gòu)破壞,染色不均勻,伊紅不著色或著色淺,組織易裂片掉片
解決方案:收樣時可以具體詢問客戶固定液信息及固定條件并提前告知客戶風(fēng)險,如果客戶能承擔(dān)風(fēng)險需簽字后進行實驗。
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