Celetrix電轉(zhuǎn)儀(細(xì)胞電穿孔儀)
1500A-EX電轉(zhuǎn)儀,*大轉(zhuǎn)染體積1000uL.
電轉(zhuǎn)染,*關(guān)心的是什么?
1.轉(zhuǎn)染效率
2.細(xì)胞死亡率
 
對(duì)一批同樣的細(xì)胞,性質(zhì)相似,為什么有的細(xì)胞順利轉(zhuǎn)入了 DNA, 有的細(xì)胞沒(méi)有得到DNA.,有的細(xì)胞電轉(zhuǎn)后活的好好的,有的就被‘電死’了。
 
從電轉(zhuǎn)儀的角度來(lái)講,
如果電轉(zhuǎn)染時(shí)候每個(gè)細(xì)胞受到的電壓相同,電擊時(shí)間相同,毫無(wú)疑問(wèn),通過(guò)調(diào)節(jié)電擊電壓,電擊時(shí)間,可以得到一個(gè)較高的轉(zhuǎn)染效率和較低的細(xì)胞死亡率。
 
問(wèn)題是,傳統(tǒng)的電擊杯,宏觀上可以控制電轉(zhuǎn)儀每次電擊時(shí)間和電壓相同,但微觀上,電擊杯里面不同位置的細(xì)胞分到的電壓相同嗎。
答案是否定的。且將電擊杯里的小世界放大了分析。
 
1.電擊杯液面部分
 電極杯內(nèi)由于液體表面張力的作用,液面不平,導(dǎo)致對(duì)液體內(nèi)部電壓分配的均勻度有很大的影響。電壓分配可以用一個(gè)簡(jiǎn)化的等效電路來(lái)說(shuō)明。電極杯內(nèi)液體可以分割成相同的部分,每個(gè)部分電阻相同多路先串聯(lián)再并聯(lián),每一路兩端總電壓相等。
液面翹角處,相當(dāng)于電阻先并聯(lián)后再串聯(lián)入電路,此處阻值變小,在電路中分壓變。ㄈ缬覉D ),細(xì)胞電壓不夠不能電轉(zhuǎn)。由于兩端總電壓相同,多出來(lái)的電壓分到液體凹面下方的區(qū)間,導(dǎo)致此處電壓過(guò)高(如右圖),細(xì)胞死亡。
結(jié)論:電極杯里靠近液面的部分細(xì)胞分配到的電壓相差較大。
 
2.靠近電極部分
電極杯中樣品與電極接觸面積大,電化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生毒性物質(zhì)多,并且產(chǎn)生非常多的氣泡。氣泡對(duì)電轉(zhuǎn)的實(shí)際影響非常大。
由于氣泡是絕緣體,電流只能從氣泡之間的間隙溶液流過(guò),這樣導(dǎo)致氣泡間隙的溶液中電流富集升高,處于其中的細(xì)胞因承受太高的電壓而死亡。氣泡作為一個(gè)球形絕緣體,可以扭曲周?chē)娏鞯淖呦。氣泡?cè)面(氣泡間隙溶液)電流變大,而氣泡的前后兩方都是低電流區(qū),處于此區(qū)的細(xì)胞得到電壓不夠,不能電轉(zhuǎn)。見(jiàn)右圖。
 
小結(jié):
電極杯內(nèi)的溶液上方受到液面效應(yīng) 影響,電場(chǎng)不均勻?拷鼉蓚(gè)電極1-2mm的區(qū)域由于氣泡的作用,電場(chǎng)也不均勻。電極杯內(nèi)電場(chǎng)比較均勻的較優(yōu)電轉(zhuǎn)區(qū)域很。ㄓ覉D藍(lán)色部分),而1mm或者2mm電極杯甚至可能沒(méi)有較優(yōu)電轉(zhuǎn)區(qū)域。
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